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石磊:快速检测方法是转基因检测的大方向

[2015/4/11]

  2015年4月9日“第八届中国国际食品安全技术论坛”(以下简称:CBIFS 2015)在扬州市扬州会议中心开幕。论坛开幕式的当天同时举办了四个专题技术研讨会,分别是:食品安全分析检测技术研讨会、食品安全快速检测技术研讨会、食品中微生物及毒素检测技术研讨会、农兽药残留及重金属检测技术研讨会。

  在食品安全快速检测技术研讨会中,来自华南理工大学轻工与食品学院的石磊教授做了题为“新型快速转基因检测方法在食品中的应用”的主题报告。

  石磊在报告中首先按照检测对象对食品转基因方法进行了分类,一种是核酸检测,其主要采用普通PCR、实时荧光PCR、巢氏PCR、竞争性PCR、基因芯片技术;另一种是蛋白质检测,主要采用的是ELISA、免疫试纸条、Westem印记技术。石磊题道,国外许多政府检测机构都在大量使用快速检测方法,尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和显色培养基法,这些快速检测方法在国外应用相当成功。国内的许多政府检测机构也都已经在使用或正在考虑使用国外先进的快速检测技术。石磊说,从长远发展趋势来说,快速方法是转基因检测的大方向。

  石磊在报告中介绍了目前常用的转基因检测方法,如胶体金免疫层析检测条、PCR—聚合酶链式反应技术、荧光PCR技术等。他说,荧光定量PCR(qPCR)技术是目前主流的分子检测技术,相关产品占据全球分子诊断市场的一半。然而这种技术 由于核酸检测过程复杂、实现核酸扩增信号检测设备价格高、对实验室硬件条件要求高等问题,只局限于高端市场,普及推广困难,基层医疗和检测机构需求得不到满足。

  基于此种现状,石磊及其团队开发了新型恒温荧光核酸扩增分子检测平台。据石磊介绍说,该平台的反应原理是一种新型的等温扩增技术,即等温多自配引发扩增(IMSA),反应体系是具有链置换特性的DNA聚合酶、dNTP、适宜的缓冲液和模板DNA,能够识别靶DNA7个特异序列的6条引物。他说,该方法特异性强,6条引物对靶序列的7个特异序列区的识别保证了IMSA扩增的高特异性;且等温高效,IMSA在等温条件下扩增,不会因为温度改变而造成时间的损失,而且受非靶序列的影响小,与PCR相比,其检测极限更小,仅为几个拷贝。基于这些优点,IMSA在1小时可完成检测,核酸染料后,肉眼就可观察结果且反应不需PCR仪和特殊试剂。

  石磊介绍说,IMSA技术已经成功产业化。目前,一台恒温荧光检测仪、搭配一台金属浴、一台混匀器、一台小型离心机及移液器和检测试剂盒即可成为一套可移动的转基因检测实验室。